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不同PCR儀的區別及運用

儀器網小編2020-11-20 16:04:51

PCR儀

簡單的說,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈,進而達到基因復制的目的。

***個基本的PCR須具備:

①要被復制的DNA模板 Template

②界定復制范圍兩端的引物Primers

③DNA聚合酶Taq. Polymearse

④合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水

目前常用的技術,可以將***段基因復制為原來的***百億至***千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。

把***次PCR擴增只能運行***個特定退火溫度的PCR儀,叫傳統的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科研研究,教學,醫學臨床,檢驗檢疫等機構。

***次性PCR擴增可以設置***系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常有12種溫度梯度,這樣的儀器叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其***適退火溫度是不同的,通過設置***系列的梯度退火溫度進行擴增,從而***次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的***適退火溫度,進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間。

原位PCR儀用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀,如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增,不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內的位置,于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有重大的實用價值。

在普通PCR儀的基礎上增加***個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統,就成了熒光定量PCR儀。熒光定量PCR儀有單通道,雙通道,和多通道。當只用***種熒光探針標記的時候,選用單通道,有多熒光標記的時候用多通道。該儀器主要用于醫學臨床檢測,生物醫藥研發,食品行業,科研院校等機構。


(來源: 儀器網小編)


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